γ-环糊精葡萄糖基转移酶的酶学性质及其产物特异性

本研究克隆了Bacillus　Clarkii7364的环糊精葡萄糖转移（CGTase）基因，构建并表达了基因重组菌株E.coli　BL21／pET28a（+）-CGTase。对-CGTase酶学的特性和产品特异性进行了研究。结果表明，克隆的CGTase的分子量为78%，水解活性和环化活性在最佳温度、最佳pH和金属离子的影响方面存在一定差异。以可溶性淀粉为底物，HPLC测定的催化产物中几乎没有CD，CD/CD的转化率高达7.70。CD的转化率为15.83%。添加10%浓度的乙醇可使-CD的产量提高89.91%，使-CD/-CD的转化率分别提高73.77%和33.44%。豌豆淀粉－CD／－CD达的催化转化率为12.92%，转化率为19.1%，分别比可溶性淀粉高63.13%和22.90%。本研究为进一步提高CGTase酶法制剂的收率和具体应用提供了重要的理论依据。