黄曲霉毒素B1高灵敏定性定量免疫层析检测方法的建立

[目的]真菌毒素可污染农产品和动物源性食品，其中黄曲霉毒素B1（AFB1）毒性大、危害大。建立快速、高灵敏度、简便的AFB1检测方法，对监测相关产品中AFB1的污染水平，保障人畜健康具有重要意义。本研究基于竞争原理，利用竞争模式优化建立了免疫层析检测方法，实现了AFB1的快速定性检测和定量分析。【方法】通过比较分析不同粒径金颗粒的抗体标记效果，优化免疫层析各组分的材料类型、相关缓冲液的配方和最佳质量浓度，建立高灵敏度的AFB1定性定量免疫层析方法。【结果】优化的免疫层析法对实际样品中AFB1的定性和定量检测限分别为2.5和0.5g·kg-1。它具有较高的敏感性和特异性，与其他常见真菌毒素无交叉反应。实验结果表明，标准加入法和加标回收率稳定，AFB1自然污染样品的定量检测结果与商品试剂盒和LC-MS/MS结果一致。[结论]本研究建立的免疫层析检测方法可用于样品中AFB1污染的快速定性检测和定量分析。它适用于缺乏实验条件的基层检验检疫机构和农产品加工企业快速筛选大量样本。疑似样品检测结果为阳性，然后用仪器法进行确认，可以降低检测成本，提高检测效率。同时，为其他病原微生物免疫层析检测方法的建立提供了参考。图9表2参考26