定心方Ⅲ号方调控JAK2/STAT3通路对肥胖小鼠脂肪炎症的影响

目的研究定心方号方（DXR）调节蛋白质酪氨酸激酶2（JAK2）/信号转导和转录激活因子3（STAT3）信号通路对肥胖小鼠脂肪组织慢性炎症的影响。方法32只8周龄雄性Aristole/-小鼠分为模型组、DXR低、中、高剂量组，每组8只。另取8只同龄雄性小鼠作为正常组。ApoE/小鼠连续饲喂西餐饲料12周建立肥胖模型后，DXR低、中、高剂量组分别灌胃6.5、13和26g/kg DXR中药汤剂，正常组和模型组灌胃等量生理盐水。每组每天给药一次，持续12周。每周测量小鼠体重。干预后，称重小鼠内脏脂肪组织并计算内脏脂肪指数。采用生化法检测血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）水平。在HE染色观察了内脏脂肪组织的病理变化。免疫组化染色分析内脏脂肪组织炎性浸润程度。通过RT-PCR肿瘤坏死因子（TNF）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP－1）mRNA表达、巨噬细胞极化标记物诱导一氧化氮合酶（iNOS）和精氨酸酶-1（Arg－1）mRNA表达检测脂肪组织的炎性因子。Western　Blot发现JAK2，磷酸化JAK2（p－JAK2），STAT3，磷酸化STAT3（p-STAT3），iNOS-Arg－1蛋白表达。与正常组相比，模型组体重和内脏重量增加，血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和HDL胆固醇（HDL-C）水平升高（P<0.05，P<0.01）。HE染色显示脂肪细胞肥大，免疫组化染色显示脂肪组织中IL-1水平升高，IL－1、IL－6、TNF、MCP－1和iNOS　mRNA的表达增加。STAT的3蛋白磷酸化水平也升高（P<0.05，P<0.01），Arg-1mRNA和蛋白的表达降低（P<0.05），免疫组化染色显示IL-1水平下调。低剂量和中剂量DXR小鼠的血清TG水平降低（P<0.05），脂肪组织中IL-1、IL－6和iNOS　mRNA的表达降低，iNOS蛋白、JAK2和STAT三种蛋白质的磷酸化水平也降低（P<0.05，P<0.01），Arg－1mRNA和蛋白质的表达增加（P<0.05，P<0.01）。血清HDL-c水平升高（P<0.01），脂肪组织中MCP-1mRNA、JAK2和STAT3蛋白磷酸化的表达降低（P<0.05，P<0.01）。结论DXR能减轻内脏脂肪组织的慢性炎症反应，其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路、改善巨噬细胞极化失衡有关。