柱前衍生化RP-HPLC法同时测定多肽类药物中7个生物胺的含量

目的：建立柱前衍生反相高效液相色谱法测定注射用胸腺肽、骨肽注射液、鲑鱼降钙素注射液、注射用谷胱甘肽、转移因子口服液和转移因子胶囊中的7种生物胺：色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸体胺、组胺、酪胺和亚精胺。方法：样品溶于0.1mol·L-1盐酸溶液中，以丹磺酰氯为衍生试剂，采用反相高效液相色谱法测定。使用C18色谱柱（250　MM4.6　 mm，5m），0。01　 mol·L-1醋酸铵溶液（a）-乙腈（b），含0.1%醋酸作为流动相，梯度洗脱（0～21　min，70%a50%a.21～25　min，50%A30%a.25～60　min，30%a.60～70　min，30%A70%a），流速1。0　ml·min-1，检测波长：Yale nm，柱温：35。结果：色胺、2-苯基乙胺、尸体胺、酪胺和亚精胺的线性范围为0.1～50　mg·L-1（r>0.05）999，腐胺的线性范围为0.06～31。本田mg·L-1（r>0.999），组胺的线性范围为0.10～26。12　mg·L-1（r>0.999）。平均回收率为73.6%~104.0%。胸腺肽和检出注射用生物胺的种类和含量最高，其次是高山制剂。骨肽注射液中仅发现检出组胺，鲑鱼降钙素注射液和注射用谷胱甘肽中未发现检出生物胺。注射用腐胺、尸体碱、组胺、酪胺和亚精胺。其中，a企业注射用组胺和腐胺含量较高，分别约为0.113%和0.159%。B企业尸体碱、酪胺和亚精胺含量较高，分别约为0.373%、0.363%和0.090%。检出转移因子口服液和转移因子胶囊中含有腐胺、尸体碱、酪胺和亚精胺。结论：该方法准确、可靠、灵敏、重现性好、操作简便。可用于多肽类药物中生物胺的测定。